亲爱的实验室小伙伴们,你是否在为Puredex® G-25M脱盐预装柱的规格选择而纠结?1mL、4.7mL、5mL、20mL……面对这些选项,该如何做出最佳选择?
今天,我们用实实在在的脱盐图谱数据和柱尺寸科学说话,为你揭开Puredex® G-25M预装柱规格选择的秘密。
尺寸即原理:理解不同规格的设计逻辑
首先,让我们看看四种规格空柱的物理尺寸差异:

表1:空柱的规格尺寸
相比较而言,1mL的7.7mm细直径短柱高设计,决定其快速筛选特性;4.7mL的7.7mm细直径长柱高设计,决定其分辨率优先特性;5mL与20mL同为16mm粗直径设计,决定其通量优先特性。

图1:Puredex® G-25M预装柱
图谱揭秘:脱盐为什么5mL和20mL脱颖而出?
不同体积的Puredex® G-25M脱盐比较:
填料:Puredex® G-25M
层析柱:1mL,4.7mL,5mL,20mL规格
样品:BSA (50mM PB, 500mM NaCl, pH7.0)
样品体积:5%柱体积
流速:100cm/h
缓冲液:50mM PB,pH 7.0


图2:Puredex® G-25M脱盐图谱
从脱盐图谱分析发现:
1mL (7.7×25mm):
优势:细短型可以对填料进行快速筛选
局限:柱床高度低,样品脱盐不完全,实际分离效果未达最佳
4.7mL (7.7×100mm):
优势:细直径,100mm柱高,理论分辨率最高
局限:直径过细,流速受限,易产生高压,不适合大体积样品
5mL (16×25mm):
黄金组合:16mm直径提供优异流速,25mm高度优化分离时间
图谱显示:分离效率高,可以实现样品的快速脱盐
20mL(16×100mm):
工艺级设计:16mm直径保证流速,100mm柱高提供超大载样空间
图谱显示:峰形尖锐对称,分离效率高,样品稀释效应最小
应用场景精准匹配
首选5mL (16×25mm) 当之无愧的日常实验“主力军”:
每日蛋白纯化后缓冲液更换
抗体、酶等珍贵样品的脱盐处理
需要快速完成且保证回收率的常规实验
关键优势:短柱床(25mm)减少样品在柱内停留时间,降低样品稀释,回收率通常>95%
升级20mL (16×100mm) 大体积处理“专家”:
细胞培养上清、发酵液等粗样品的初步处理
工艺开发阶段,需要多次重复实验的稳定性验证
高浓度样品的直接处理
关键优势:100mm柱高提供足够分离距离,即使大体积样品也能保证分离度
技术细节深度解析
为什么直径变化如此重要?
7.7mm细柱:适合分析级应用,但对样品黏度敏感
16mm粗柱:降低柱压,提高处理能力,更适合制备级需求
柱高如何影响分离?
25mm短柱:分离快速,适合简单脱盐(缓冲液更换)
100mm长柱:提供更多理论塔板数,适合复杂样品或更高纯度需求
5mL (16×25mm) 的“矮胖”优势
低压操作:直径增大,流速相同时柱压更低
快速分离:25mm柱高意味着更短的运行时间
实验室实战技巧
使用5mL(16×25mm) 规格时:
操作流速推荐:1-10 mL/min
样品体积推荐:0.1-1.5 mL
再生建议:可重复使用5-10次,保持良好性能
使用20mL (16×100mm) 规格时:
最佳流速:3-14 mL/min
样品体积推荐:≤6mL
特殊应用:适合处理含有微小颗粒的粗样品,不易堵塞
使用不同规格预装柱时,需注意:
所有规格均需避免柱床干涸
样品粘度影响显著,高粘度样品应降低流速
建议先用小规格优化条件,再平行放大至大规格
总结
Puredex® G-25M脱盐预装柱的规格差异不仅仅是体积数字的变化,更是柱尺寸科学设计的体现。通过直径与高度的巧妙组合,5mL (16×25mm) 规格实现了通量与分辨率的黄金平衡,而20mL (16×100mm) 规格则为大体积样品处理提供了可靠解决方案。
理解这些背后的尺寸科学,能让你的实验设计更加精准高效!
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