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纯化小技巧| 阳离子交换层析介质MaXtar® S HC助力蛋白纯化提升效率


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离子交换层析(ion-exchange chromatography,简称IEC)分离蛋白质的原理是利用离子交换层析介质上的可交换离子,与被分离蛋白所带电荷的不同,在一定pH条件下发生交换平衡,从而实现分离。


通俗点讲,就是带正电荷的分子与阳离子交换层析介质(CEX)结合,而带负电荷的分子会与阴离子交换层析介质(AEX)结合。


离子交换层析介质在蛋白质的分离纯化中有着广泛的应用,主要是因为其具有灵敏度高、选择性好、易于重复等优点,可以应用在样品粗纯、中度纯化及精纯等纯化过程中,同时可以用于DNA和内毒素的去除上,对于抗体上的点电荷异构体也有很好的分离效果。


百林科作为全方位供应层析填料产品的企业,在离子交换层析介质上也有广泛的产品覆盖,以满足客户多样化的纯化需求。百林科阳离子交换层析介质主要有MaXtar® S HC、MaXtar® SP HR、MaXtar® S等等。

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其中,MaXtar® S HC因其高载量、高分辨率的优势成为阳离子交换层析介质中的明星产品,适用于单抗,双抗,Fc融合以及ADC等药物纯化,可有效去除聚集体、片段、电荷异构体、HCP等。早期我们也有对其高载量、高回收率等有所介绍,今天重点介绍一下MaXtar® S HC的一些其他产品性能。


批间差异小,工艺稳定

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MaXtar® S HC的多个批次的动态载量(QB10)数据进行回顾,MaXtar® S HC保持较高的动态载量(>100 mg IgG/ml),批间差异小(RSD<10%)。


良好的放大性

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在600/500层析柱中,柱高26 cm时,使用纯水和1M NaCl测定MaXtar® S HC的压力/流速性能,测定结果显示流速≤300 cm/h,压力<3 bar(0.3 MPa, 43.5 psi)。


保留时间短

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MaXtar® S HC在2~8 min保留时间内,动态载量(QB10)仍保持较高的水平(>100 mg IgG/ml)。


HCP去除效果好

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同MaXtar® SP HR比较,MaXtar® S HC纯化后,无论是等度还是线性洗脱,HCP的残留量可以做到更低。


纯化案例

层析柱:4.7 ml预装柱,装柱高度10 cm,柱体积约4.7 ml

样品:阴离子交换层析介质纯化后的单抗料液

平衡缓冲液:50mM醋酸钠,pH5.12

洗脱缓冲液:50mM醋酸钠,1M氯化钠,pH5.11,0~100%B 20CV

保留时间:5 min


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图1. MaXtar® S HC的结合洗脱图谱


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表1. MaXtar® S HC的纯化结果


MaXtar® S HC纯化后单抗样品纯度达99.4%,收率为92.6%,HCP去除效果显著。


产品货号


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订货信息

欢迎联系当地销售和技术人员或拨打热线:400-058-9000。


点击查看 MaXtar® 离子交换填料系列

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