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新品发布| 友好高效的阳离子交换层析介质--MaXtar® S HC


抗体、重组蛋白等纯化过程中,除去蛋白A亲和和阴离子交换外,另一最重要的层析介质就是阳离子交换层析介质。阳离子交换层析介质通常用在纯化中的精纯步骤,以去除HCP等痕量杂质。随着现代研发人员对产品纯化的高要求,使用者对填料提出了高载量和回收率,兼具高选择性的要求。在这种背景下,百林科通过不断努力创新,研发出了具有高载量高分辨率的阳离子交换层析介质-- MaXtar® S HC。



MaXtar® S HC是一款高载量高分辨率的强阳离子交换层析介质,利用不同分子在特定条件下电荷性质和多少的差异对其进行分离。

相比于传统的强阳离子交换层析介质,MaXtar® S HC表现出更优的性能:

(1)改良的MaXtar基架具有更强刚性,因此在较低的反压下能够实现更高工艺流速,提高工艺效率。


(2)通过升级配基偶联方式,在保证分离效果的同时,兼具高动态结合载量。



参数介绍



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* 结合载量的测量条件:4.7ml 预装柱,装柱高度:10cm,在保留时间为5分钟时测量10% 穿透时的动态结合能力。测试缓冲液:50mM 醋酸钠,pH 5.5(单克隆抗体)。

** 层析介质在40℃,pH2-14环境下放置7天后,其理化性质和功能没有明显变化。

*** v/v,体积比。



性能表现--高载量



采用CHO细胞表达的单克隆抗体(精纯后蛋白)作为样品,对MaXtar® S HC和MaXtar® SP HR的DBC(动态结合载量)进行探索,发现:MaXtar® S HC的DBC明显优于MaXtar® SP HR,是其的2倍。实验条件如下:




层析柱:4.7 ml预装柱,装柱高度10 cm,柱体积约4.7 ml


样品:CHO细胞表达的单克隆抗体(精纯后蛋白)


平衡缓冲液:50mM醋酸钠,pH5.5


洗脱缓冲液:50mM醋酸钠,1M氯化钠,pH5.5


保留时间:5 min



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图1. MaXtar® S HC和MaXtar® SP HR 10%穿透(QB10)曲线


表1. MaXtar® S HC和MaXtar® SP HR在QB10的动态结合力


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性能表现--高回收率



我们采用0.8的安全系数,进行上样洗脱测试,发现:两款填料的洗脱回收率都可以达到97%以上。实验条件如下:




层析柱:4.7 ml预装柱,装柱高度10 cm,柱体积约4.7 ml


样品:CHO细胞表达的单克隆抗体(精纯后蛋白)


平衡缓冲液:50mM醋酸钠,pH5.5


洗脱缓冲液:50mM醋酸钠,1M氯化钠,pH5.5


保留时间:5 min



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图2. MaXtar® S HC和MaXtar® SP HR的结合洗脱图谱


表2. MaXtar® S HC和MaXtar® SP HR的纯化结果

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DMSO耐受--适用于ADC精纯



MaXtar® S HC浸泡15%DMSO,200 h后,对浸泡前后的DBC(动态结合载量)和检测过程中的压力进行对比,DMSO浸泡后MaXtar® S HC的DBC满足浸泡前的95%以上,同时,浸泡前后压力值均在可接受范围内,无明显压力上升情况。综上所述,MaXtar® S HC层析介质在15%DMSO溶液中200h稳定。



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图3. MaXtar® S HC DMSO浸泡前/后10% 穿透(QB10)曲线


表3. MaXtar® S HC DMSO浸泡前/后在QB10的动态结合力

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6.png图4. MaXtar® S HC检测过程压力曲线

应用案例



依据单抗料液实际载量的80%进行上样洗脱测试,发现:MaXtar® S HC纯化后样品纯度达99.4%,收率为92.6%,HCP去除效果显著。实验条件如下:




层析柱:4.7 ml预装柱,装柱高度10 cm,柱体积约4.7 ml


样品:阴离子交换层析介质纯化后的单抗料液


平衡缓冲液:50mM醋酸钠,pH5.12


洗脱缓冲液:50mM醋酸钠,1M氯化钠,pH5.11,0~100%B 20CV


保留时间:5 min



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图5. MaXtar® S HC的结合洗脱图谱


表4. MaXtar® S HC的纯化结果


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产品货号

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