应用案例：Car-T的细胞培养工艺优化方案

美国时间2023年5月10日，Emily Whitehead 基金会网站如期发布了Emily无癌生存11年的照片[1]。这位全球首位接受试验性CAR-T细胞免疫治疗的儿童，如今已经18岁了，11年前，Emily身患急性淋巴白血病，在生命垂危之际接受了CAR-T免疫疗法。

Emily的成功治愈，吹响了全球CAR-T免疫细胞治疗的飞速发展的号角。

细胞治疗具备高度精准化和个性化的优势。自2017年首款 CAR-T 细胞疗法 Kymriah 获美国 FDA 批准上市以来，细胞疗法在过去的几年发展迅猛，全球范围内有多款CAR-T药物获批上市。中国企业也在全球范围内上市了3款产品。

在CAR-T 治疗过程中，需将经过技术改造的 T 细胞进行体外培养，达到符合治疗要求的细胞数量后，再回输到病人体内靶向杀死癌细胞。

CAR-T细胞生产过程包括：最初分离和富集T细胞、T细胞活化、使用病毒或非病毒载体系统进行CAR基因转移、体外CAR-T细胞扩增，以及最后的末端工艺和冷冻保存，整个制造周期一般需要2～4周。

CAR-T生产的每个环节都存在一些变量，这些变量会影响CAR-T细胞质量，因而是关键质量属性及优化重点考量点。根据我国首个《CAR-T细胞制剂制备质量管理规范》，CAR-T细胞产品在生产时的每一个环节都应严格遵循临床要求。

CAR-T细胞产品作为“活的”药品，与传统生物制品相比，其在生产工艺、质量研究、质量控制、放行检测和稳定性研究等方面均需要特殊考量，面临的挑战更大，需要更加全面和充分的分析方法来保证CAR-T细胞质量控制方法的稳定性和高效性。

百林科作为生物制药工艺核心解决方案供应商，致力于为细胞治疗研发企业提供更高效趁手的工具，从而助力药物的发展和创新。由百林科自主研发生产的CytoLinX® WB 系列一次性波浪式生物反应器，采用先进的 PID 反馈控制技术和光纤电极光补偿技术，可进一步助力CAR-T企业提高细胞培养工艺的稳定性和可靠性：

结论

由上述实验结果可以看出，使用CytoLinX® WB 一次性波浪式生物反应器流加培养T细胞，在培养第8天，细胞密度达到17.1×106 cells/ml，细胞增长趋势、活率和代谢产物也与历史批次相似，培养的结果符合预期。

CytoLinX® WB 一次性波浪式生物反应器具备多种型号，包括10L、20L和50L，能够兼容 0.3L-25L 培养体积。通过将培养袋置于摇动平台上摇动，培养基在培养袋中形成波浪式运动，起到良好的供氧和混合作用，提供温和低剪切力高溶氧的细胞培养微环境，避免了传统罐体中搅拌桨叶端产生的剪切力和鼓泡对细胞的伤害，有利于改善细胞状态。波浪式起伏的培养基液面，不断地和通入培养袋内的氧气反复接触混合，为细胞生长提供足够的溶氧。通过调节平台摇动转速和角度，以及向培养袋内通入一定比例的空气 / 氧气混合气，能够提高细胞密度和产品产量。

CytoLinX® WB的培养体积范围灵活、操作简单、控制精密可靠、易于工艺放大，适用于各种类型的细胞培养，可广泛用于科研、研发、生产中的种子培养，及新型疗法如细胞治疗等领域。