Puredex® G-25是一系列交联葡聚糖基架的,凝胶过滤层析介质,利用不同分子的分子量差异对其进行分离。
层析过程中,大于凝胶过滤层析介质孔径的大分子,沿外水下移,路径最短,最先被洗脱出来;分子量中等的物质,部分进入凝胶过滤层析介质内部,洗脱速度稍慢,后大分子物质而出;小分子物质则全部进入凝胶过滤层析介质内部,洗脱速度最慢,最后被洗脱出来,故而不同分子量的物质被分离开来。
Puredex® G-25系列由四款不同粒径的层析介质组成,按照颗粒粒径从大到小排列,分别冠以C(Coarse,粗粒径)、M(Medium,中等粒径)、F(Fine,细粒径)、SF(Superfine,超细粒径)的后缀。该系列层析介质通常用于多种生物分子的脱盐、缓冲液置换,以及小分子物质的分离纯化,比如:多肽等。
优异的放大生产能力
适应不同体积样品的处理需求,容易线性放大。
放大生产稳定,已有较多600-800 mm 柱规模放大生产。
使用小技巧推荐
Puredex® 系列层析介质以干粉形式供应,在使用前必须在足量的缓冲液中膨胀。有时也可以通过使用沸水浴来加速,沸水浴也可对缓冲液进行除气。
膨胀后的层析介质可以制成匀浆比为75%的混悬液进行装柱。
对于实验室规模的脱盐,通常建议选择较为保守的样品体积,即低于柱体积的20%。
上样前需对样品进行过滤,以除去其中的细胞碎片或颗粒物质。
为了减少或降低可能存在的离子相互作用,在脱盐过程中及终样品缓冲液中可以保持低盐度(例如:25 mM NaCl)。
当缓冲液中不适合NaCl存在时,有时可以加入100 mM 醋酸铵或碳酸氢铵等挥发性溶剂。
如脱盐柱使用过多次,且需要去除沉淀的蛋白质或其他污染物时,可以使用2倍柱体积的0.2 M NaOH或非离子洗涤剂(保留60-90 min)。
技术参数
* 干粉状态下测量,分布在范围内的百分比≥80%
化学耐受性
* 层析介质在40 ℃,pH 2-13 环境下放置7天后,其理化性质和功能没有明显变化。
应用案例
Puredex® G-25M对某蛋白样品进行脱盐
填料:Puredex® G-25M
层析柱:Chrom-LinX® 26/400 (H=34 cm)
样品:某蛋白样品(~750 kD)
样品体积:20 mL
流速:8 mL/min
缓冲液:10 mM 醋酸-醋酸钠,pH 6.0
预装柱
除去散装填料自由装填高度外,百林科还推出了Chrom-Trap® 系列预装柱,将Puredex® G-25M凝胶过滤层析介质装填在Chrom-Trap® 预装柱中,其内径为16 mm,柱床高度为25 cm,适用于客户端样品的快速制备纯化。每一根预装柱都经过柱效检测,重现性好,操作简便,可轻松连接至层析设备。
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